導(dǎo)語
紫外可見分光光度計是分析測試實驗室里常見的一種分析儀器,屬于光學(xué)儀器的一種,可廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機械、冶金、石油、食品、生物、材料、計量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個方面,用來進行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等。
一、紫外可見分光光度計的誕生
世界*紫外可見分光光度計誕生于1918年的美國國家標(biāo)準(zhǔn)局。后來紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進,又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,其應(yīng)用范圍也在不斷擴大。紫外可見分光光度法從問世以來,在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上,促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新,功能更加齊全,使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍。
二、紫外可見分光光度計的工作原理
1、紫外可見分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似,利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質(zhì),引起分子中價電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜,反映了試樣的特征。
2、紫外可見光的范圍內(nèi),對于一個特定的波長,吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此測量光譜可以進行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進行定量分析。
三、*使用紫外可見分光光度計人員須知
1、*使用紫外可見分光光度計的人員,一般來說,一定要詳細(xì)閱讀儀器安全操作手冊,否則嚴(yán)禁操作儀器。準(zhǔn)備操作儀器前,需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下,表面指針是否指向零刻度。如若不是,理應(yīng)先調(diào)零然后才能連接電源。在使用的過程中,操作員應(yīng)該盡量避免對鏡燈的觸碰,放大器使用過后,一定需要把檔位歸置到零。
2、除此之外,在操作紫外可見分光光度計時,操作人員需要留意一下機器的干燥劑,因為這是非常重要的。通常情況下,干燥劑有效時,儀器的工作是不會出現(xiàn)任何問題的??墒钱?dāng)干燥劑失效之后,所出現(xiàn)的問題是非常嚴(yán)重的。除了儀器上面顯數(shù)不準(zhǔn)之外,很容易使反射鏡變得污穢,從而使得光線率不準(zhǔn)確。因此,日常使用儀器時,一定要注意干燥是否有效。當(dāng)發(fā)現(xiàn)失效后,要及時進行更換。
四、分光光度計使用注意事項
1、紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2、筆試PH計測定時,禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,要盡可能及時清理干凈。
3、比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
4、實驗結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記,得到管理老師認(rèn)可方可離開。
五、紫外可見分光光度計出現(xiàn)問題處理方法
1、儀器電源接通后,光源不亮。
原因:
?、俟庠礋襞菀褤p壞。
?、诒kU管燒壞。
處理方法:
?、俑鼡Q氘燈或鎢燈。
?、诟鼡Q保險管。
2、紫外可見分光光度計噪音較大。
原因:光源燈泡使用時間超過壽命期。
處理方法:更換光源燈泡。
3、自檢時提示波長自檢出錯。
原因:自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
處理方法:關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
4、儀器自檢時提示通訊錯誤。
原因:儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
處理方法:連接好數(shù)據(jù)線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。
5、儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上。
原因:在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調(diào)整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良。
處理方法:更換電位器。
6、在使用過程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
原因:
①光電倍增等老化,性能降低。
?、谛盘柼幚戆蹇赡馨l(fā)生故障。
?、矍爸梅糯蟀娉霈F(xiàn)故障,引起反饋量增大。
處理方法:
?、匍_機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
?、谶M一步檢查信號處理板,未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測,結(jié)果測得數(shù)據(jù)正常,這說明信號處理板*。
7、測試過程中提示能量太低。
原因:
?、俟庠礋襞菔褂脮r間超過壽命期。
?、跇映刂杏胁煌腹獾臇|西擋住了光。
處理方法:
?、俑鼡Q光源燈。
?、谀米邠豕獾奈锲?。
8、吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值(常見)。
原因:沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。
處理方法:做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液。
9、當(dāng)儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡易儀器。
原因:開關(guān)觸點因長期氧化所致造成接觸不良。
處理方法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。
10、樣品信號重現(xiàn)性不良
原因:排除儀器本身的原因外,大的可能是樣品溶液不均勻所致,在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復(fù)推拉不在同一個位置上。
處理方法:
?、俨扇≌_的試樣配置手段。
②修理推拉式樣品架的定位碰珠。